1.  引言

卡巴他賽( cabazitayel) 是新一代紫杉烷類化合物( 結構式見圖 1) ，通過干擾細胞有絲分裂和分裂間期細胞功能所必需的微管網(wǎng)絡而起到抗腫瘤作用。臨床前研究顯示，卡巴他賽對多種多西他賽敏感及不敏感的移植瘤均表現(xiàn)出很高的抗腫瘤活性。

2010 年，卡巴他賽注射液( 商品名 Jevtana) 由美國 FDA 批準，與潑尼松聯(lián)合用于治療既往已接受過一種含多西他賽治療方案的轉移性激素不應性前列腺癌。但吐溫 80 的使用可導致嚴的過敏反應及外周神經(jīng)毒性、嗜中性粒細胞減少癥等毒副作用，同時也會影響藥物在體內(nèi)的分布，使藥物呈現(xiàn)非線性藥代動力學分布; 乙醇可能會影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)。脂肪乳劑因具有溶劑特性，能夠提高載藥量，其將藥物包裹在內(nèi)相避免與血管直接接觸，減少藥物降解并降低刺激性，耐受終端滅菌等特點使其成為難溶性藥物的良好載體。

本文作者采用高壓均質(zhì)技術，制備了高載藥卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液(平均粒徑在200 nm 的脂肪乳劑) ，并通過粒徑、pH 值、殘氧量、全氧化值和藥物含量等指標，研究容器內(nèi)殘氧量對卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液穩(wěn)定性的影響。

2.  儀器設備

Nicomp 3000 納米粒度儀

品牌：美國PSS，Nicomp 3000系列

原理：納米粒度儀采用動態(tài)光散射原理(DLS)檢測分析樣品的粒度分布。基于多普勒電泳光散射原理檢測ZETA電位。其主要用于檢測納米級別及亞微米級別的體系，粒徑檢測范圍0.3nm-10μm，ZETA電位檢測范圍為+/-500mV。DLS從傳統(tǒng)的光散射理論中分離，關注光強隨著時間的波動行為。我們通過光強值的波動得到自相關函數(shù)，從而獲得衰減時間常量τ，根據(jù)公式換算獲得粒子的擴散系數(shù)D，再根據(jù)Stocks-Einstein方程計算粒徑大小。

檢測關鍵點：粘度、折光率、溫度

圖2 原理圖	圖3 儀器外觀

3.  樣品制備及表征

卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液的制備主要分為四個部分，分別是油相制備、水相制備、初乳制備、均質(zhì)乳化。

① 油相制備：稱取 0. 12 g 卡巴他賽與 1. 2 g 蛋黃卵磷脂E80 溶解于適量無水乙醇，于 80 ℃ 用磁力攪拌將無水乙醇揮干至恒重，再加入 0. 05 g 油酸，0. 2 g 膽固醇和 10 g 中鏈甘油三酯，用磁力攪拌于 70 ℃攪拌混合均勻，即得油相。

② 水相制備：稱取 0. 2 g 泊洛沙姆 188 和 2. 25 ～ 2. 50 g 注射用甘油溶解于適量氮氣飽和的注射用水中，75 ℃ 保溫待用，即得水相。

③ 初乳制備：在高速分散機剪切下，緩慢將水相加入上述油相中，再以 10000 r·min 的轉速下攪拌3 min，得到初乳;

④ 均質(zhì)乳化：將初乳冷卻后，用 0. 1 mol·L NaOH溶液調(diào) pH 值至 6. 80 ～ 6. 90，以氮氣飽和的注射用水定容至 100 mL，轉移至高壓均質(zhì)機中，2. 0 × 10 kPa 均質(zhì) 2 次，8. 0 × 10 kPa 均質(zhì)6 次。將終乳經(jīng) 0. 22 μm 微孔濾膜過濾，分裝入西林瓶，充入氮氣后軋蓋密封。

制備的卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液灌裝 30 mL 置 50 mL 的西林瓶中，在軋蓋密封時，固定氮氣流的壓力與速度流量，通過調(diào)整充氮時間控制充入氮氣量的多少，平行操作將樣品分成低氧組( 容器內(nèi)殘氧量低) 及高氧組( 容器內(nèi)殘氧量高) 。

分別避光置于 40、60 和 80 ℃恒溫水浴槽中，分別于 0、1、3、5 和 10 d 時取樣，用冷水浴迅速降至室溫使反應終止，將卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液用純化水稀釋后用 Nicomp 3000 測定脂質(zhì)微球的平均粒徑與分布。

4.  實驗結果

大部分氧化磷脂會導致磷脂分子層的無序性。氧化后磷脂不飽和脂肪酸側鏈斷裂，使其親脂性降低而更傾向于水相，非極性側鏈分子間作用力減小降低了界面膜的強度，引起脂質(zhì)微球的物理不穩(wěn)定性。

但本研究中，制劑在加速試驗中平均粒徑和分布并沒有顯著增大，可能因為在處方中加入了適量膽固醇，在遠高于磷脂相變溫度( E80 相變溫度約 8 ℃) 的加速條件下，膽固醇改善了氧化磷脂導致的界面膜的無序性，提高制劑的物理穩(wěn)定性，避免了乳滴的增大。

5.  結論

對比試驗中，Nicomp 3000 對脂質(zhì)微球顆粒大小、顆粒分布、Zeta電位進行表征，從而篩選配方，節(jié)省研發(fā)時間。此外還可搭配PSI微射流均質(zhì)機、AccuSizer顆粒計數(shù)器、LUM穩(wěn)定性分析儀，為脂質(zhì)體的研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制提供整套解決方案。

7.  結論

參考資料

[1] 李爽,劉陽,何海冰,樸洪宇,唐星.卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液容器內(nèi)殘氧量對制劑穩(wěn)定性影響[J].沈陽藥科大學學報,2016,33(12):932-937+944